無塵棚沉降菌監(jiān)測規(guī)范操作程序

1目地：精確監(jiān)測無塵棚潔凈棚沉降菌落數(shù)，保證生產(chǎn)制造及檢測棚域空氣中的微生物菌種總數(shù)符合規(guī)定，確保產(chǎn)品品質。

2范疇：適用本企業(yè)潔凈棚。

3責任者：生測組沉降菌監(jiān)測工作人員按此規(guī)范實行。

4變動緣故：進一步完善操作程序，使之更為標準，有效。

5內(nèi)容：

5.1取樣容器的沖洗與消毒殺菌

5.1.1首先用冷水將培養(yǎng)皿清洗多次，再用適合的刷子,清洗液不斷清洗再用生活用水清洗至沒有氣泡，最終用純水系統(tǒng)清洗晾曬。

5.1.2將培養(yǎng)皿放進不銹鋼板培養(yǎng)皿筒里再放進電加熱控溫鼓風干燥箱250℃干熱滅菌器一小時。 

5.2儀器設備與機器設備

5.2.1潔凈臺，電加熱控溫鼓風干燥箱、恒溫培養(yǎng)箱、不銹鋼板培養(yǎng)皿筒 ， 培養(yǎng)皿，酒精噴燈。

5.2.2培養(yǎng)液：營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液，玫紅鈉瓊脂培養(yǎng)液

5.3培養(yǎng)基培養(yǎng)皿的制取

5.3.1將培養(yǎng)液加溫融化，冷至45℃時，在無菌檢測情況下實際操作，將培養(yǎng)液引入培養(yǎng)皿，每皿約15ml～18ml。

5.3.2待瓊脂凝結后，將培養(yǎng)液培養(yǎng)皿倒放置30～35℃和23～28.℃恒溫培養(yǎng)箱中各自塑造48鐘頭和72小時保證培養(yǎng)液培養(yǎng)皿上無菌檢測時即可應用，將制取好的培養(yǎng)液培養(yǎng)皿在4～8℃的條件中儲放。

 

5.4取樣方式：將已制取好的培養(yǎng)皿置放在預先確定的抽樣點，開啟培養(yǎng)皿蓋使培養(yǎng)液表層曝露要求時間，再將培養(yǎng)皿蓋緊蓋。

5.5塑造

5.5.1所有取樣完畢，將培養(yǎng)皿顛倒`

5.5.2各自放進30～35℃, 23～28℃恒溫培養(yǎng)箱中塑造48鐘頭，72小時。

5.5.3每次培養(yǎng)液，做對比塑造，每次培養(yǎng)皿的數(shù)量不能低于2個。

5.6取樣點數(shù)量及至少培養(yǎng)皿數(shù)

5.6.1取樣點數(shù)量

總面積(m2)	潔凈度等級等級
	100	10.000	100.000
<10	2-3	2	2
≥10-<20	4	2	2
≥20-<40	8	2	2
≥40-<100	16	4	2
≥100-<200	40	10	3
注：表格中的總面積，針對單邊流無塵棚，指的是排風總面積，針對非單方面流無塵棚指的是棚間總面積

5.6.2每十平方米所需培養(yǎng)皿數(shù)

潔凈度等級等級	所需培養(yǎng)皿數(shù)（個）
100級	每兩平方米放3個，每十平方米放14個。
10.000級	2
100.000級	2
300.000級	2

 

5.6.3取樣點的布局

5.6.3.1工作中棚測試用例部位離路面0.8～1.5m（稍高于工作臺面）。

5.6.3.2可在主要設備或重要工作中主題活動范疇處提升測量點，取樣點的布局勻稱，防止取樣點某部分棚域過度集中化某部分棚域過度稀少。

5.7數(shù)值：用記數(shù)方式得到每一個培養(yǎng)皿的菌體數(shù)。每一個測量點的沉降菌的均值菌體數(shù)用計算公式。          

     均值菌體數(shù)M=（M1 M2 M3 … Mn）/   n

式中，M――均值菌體數(shù)；

      M1――1號培養(yǎng)皿菌落數(shù)；

      M2――2號培養(yǎng)皿菌體數(shù)；

      Mn――n號培養(yǎng)皿菌落數(shù)；

      N――培養(yǎng)皿數(shù)量；

5.8生產(chǎn)制造棚檢驗

5.8.1取樣情況和時間

5.8.1.1靜態(tài)數(shù)據(jù)：30分鐘；動態(tài)性：生產(chǎn)過程24小時檢驗，每4鐘頭換一次培養(yǎng)皿。

5.9 監(jiān)測次數(shù)：

5.9.1生產(chǎn)制造棚在商品生產(chǎn)制造期內(nèi)，依據(jù)潔凈棚潔凈室等級各自開展監(jiān)測。

5.9.1.1千級及萬級棚，各棚每日應監(jiān)測，但取樣量及采樣數(shù)量可以降低

5.9.1.2表層環(huán)境污染及人體細菌檢測在無菌檢測藥物生產(chǎn)制造期內(nèi)每日應開展。

5.9.1.3十萬級棚各棚應每星期監(jiān)測一次。

5.9.1.4三十萬級棚各棚應每兩個星期監(jiān)測一次。

5.10產(chǎn)品質量檢驗部解決各棚按時抽樣檢驗：靜態(tài)數(shù)據(jù)30分鐘；動態(tài)性4鐘頭。

潔凈度等級等級	10，000級及100級	100，000級	300，000級
測試狀態(tài)	動態(tài)性	動態(tài)	動態(tài)性
檢測次數(shù)	1次/周	1次/月	1次/季

5.11棚在停工后產(chǎn)蛋前的監(jiān)測按請驗單立即開展。

 

 

5.12潔凈度等級等級及規(guī)范

潔凈度等級   情況及規(guī)范	100級	10000級	100000級	300000級
靜態(tài)數(shù)據(jù)（個/皿）	≤1	≤3	≤10	≤15
動態(tài)性（個/皿）	≤1	≤10	≤30	≤50

注：黃曲霉菌不可驗出

5.1.3假如檢測結果所有合乎標準，即開達標匯報。如果有某些棚間不符合標準，將開不合格報告，規(guī)定馬上采取措施，直至合格。